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CFSE染色流式实验
Carboxy fluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯)染色法,是一种检测细胞分裂的方法。CFSE能够轻易穿透细胞膜,被细胞内的酯酶除去醋酸酯组分后产生荧光,而未进入细胞的CFSE无荧光(Quah等,2007)。
Carboxy fluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯)染色法,是一种检测细胞分裂的方法。CFSE能够轻易穿透细胞膜,被细胞内的酯酶除去醋酸酯组分后产生荧光,而未进入细胞的CFSE无荧光(Quah等,2007)。 荧光态的CFSE与细胞内的氨基共价结合,偶联到蛋白上,伴随细胞分裂过程,平均分配到子代细胞中,子代细胞荧光强度减少一伴。荧光强度随子代细胞分裂而递减,通过流式细胞技术,能够检测荧光强度递减产生的不同荧光强度的峰,可以监测细胞分裂状态,检测细胞增殖情况(Fulcher和Wong, 1999)。 以体外OTII多肽刺激小鼠脾脏细胞为例,用CFSE标记脾脏细胞,添加刺激T细胞的OTII多肽,体外培养脾脏细胞,刺激其中的T细胞使其增殖,流式细胞技术检测T细胞增殖情况。通过选取不同时间节点检测T细胞分裂状态,验证OTII多肽对T细胞增殖的影响。
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