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CD4+辅助性t淋巴细胞(helper t cell,th)是细胞免疫的介质,在活化其他免疫细胞(如B细胞和细胞毒性T细胞)以及调节免疫反应中起着关键作用。
抗体作为免疫系统的组成部分,在抵御疾病中发挥重要的作用。抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependentcell-mediated-cytotoxicity,ADCC),是抗体发挥作用的方式之一,当IGG抗体通过Fab段与靶细胞(病毒感染的细胞及肿瘤细胞)表面抗原决定簇特异性结合后,其Fc段可与有FcR的杀伤细胞(NK细胞、单核-巨噬细胞、中性粒细胞)等效应细胞结合,触发效应细胞的杀伤活性,直接杀伤靶细胞(病毒感染的细胞及肿瘤细胞)。能够对靶细胞产生ADCC效果是靶向癌相关抗原的抗体候选分子的一个重要功能性指标。
ADCP是抗体药物靶向治疗肿瘤等疾病的作用机制之一,当前以增强巨噬细胞对治疗性抗体反应为目的的治疗策略已引起研究者的重视,包括探寻新的靶点和研发具有更强功能的抗体等。
补体是存在于人或脊椎动物血清与组织液中的一组不耐热的,经活化后具有酶活性的蛋白质,包括30余种可溶性蛋白和膜结合蛋白。补体依赖的细胞毒性作用(Complement Dependent Cytotoxicity, CDC)是补体通过特异性抗体与细胞膜表面相应抗原结合,激活补体经典途径,形成的攻膜复合物裂解靶细胞的作用。抗体与补体C1q首先结合,接着C2-C9就被激活形成攻膜复合物对靶细胞发挥裂解效应。
细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome, CRS)是指机体感染病原微生物后出现过激免疫反应导致短时间内多种细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6、IL-12、IFN-α、IFN-β、IFN-γ等大量免疫细胞被激活,导致释放大量细胞因子引发的严重全身炎症反应综合征。这种过量的细胞因子会对组织器官造成损害从而诱发各种临床表现,目前常规的措施就是对引发细胞因子风暴的细胞因子进行密切检测。
抗体药物的靶点主要是细胞表面与疾病相关的抗原或特定的受体分子。通过流式细胞仪测定细胞的阳性群来检测配体与抗体的竞争结合情况。选用携带抗原的细胞进行检测,细胞表面的抗原空间节后更接近体内存在形式,使待测结果更接近实际情况。
细胞内因子流式实验
细胞内细胞因子染色是用抗细胞因子抗体与细胞表面或胞内特定亚群标志组合,即可检测不同细胞亚群细胞因子的分泌。Th1细胞分泌IFN-g、IL- 2、TNF-a;Th2细胞分泌IL-4;IL-5;IL-10。
细胞内细胞因子染色是用抗细胞因子抗体与细胞表面或胞内特定亚群标志组合,即可检测不同细胞亚群细胞因子的分泌。Th1细胞分泌IFN-g、IL- 2、TNF-a;Th2细胞分泌IL-4;IL-5;IL-10。
技术优势:
快速:流式定量检测细胞内细胞因子可在一天内完成, 实验流程需6-8小时,实际操作时间为1-2小时,快速简便。
简便:无需组织培养,可以全血分析,无需分离PBMC。
灵敏度高:高度灵敏的荧光标记与检测系统。
高效:可以在同一个细胞内同时检测两种或更多种细胞因子,也可根据细胞免疫表型区分分泌细胞因子的细胞的亚型,进行多参数相关分析。
安全:减少样本处理与生物源性污染。
接近生物体的分析条件:全血检测保留细胞及生化微环境更准确反映了体内状况。
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