小“生”有理（七）|融合蛋白、单链抗体scFV、双抗柔性Linker (G4S)n 检测抗体
发布时间：
2024-06-27 17:23
去年Hycells首发的爆款通用型 CAR 阳性率检测抗体Anti-G4S linker，因其便捷的操作性和精准性，迅速虏获了一批客户的认可与合作。Anti-G4S linker是经广大客户验证的通用型CAR阳性率检测试剂，通过消除不必要且耗时的步骤，加快药物研发进程。它适用于所有靶点的含G4S Linker的CAR检测 ((G4S)n, n≥2)，不同抗体类型CAR检测 (含(G4S)n, n≥2)；有着强大的免干扰性，无惧抗原干扰，体内检测CAR比例更准确；高灵敏度，极高或者极低浓度下都表现出极佳的检测效率。
基于Anti-G4S linker产品的成功开发和客户应用的正向反馈，Hycells在原有技术服务平台的基础上推陈出新，继续衍生不同应用场景，进一步开发了新品G4S-HRP，致力于服务携有linker（G4S）n结构的融合蛋白、单链抗体scFV、双特异性抗体药物研发平台，为其提供筛选、检测和靶向研究中的重要工具抗体。
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
| GS-ARHR20 | Anti-(G4S)n (B02H1)mAb(HRP) | 20μL |
| GS-ARHR100 | Anti-(G4S)n (B02H1)mAb(HRP) | 100μL |
| GS-ARHR200 | Anti-(G4S)n (B02H1)mAb(HRP) | 200μL |
| GS-ARHR1000 | Anti-(G4S)n (B02H1)mAb(HRP) | 1ml |
Specificity：This product is specific for scFvs in different species (humanized, mouse) and different orders (VH-linker-VL, VL-linker-VH). It can also recognize various forms of scFv-based bispecific antibodies, such as DART, BiTE, TandAbs, IgG(H)-scFv2, scFv-Fab-Fc, etc.
Host Species：Rabbit
Conjugate：Horseradish peroxidase (HRP)
Concentration：0.5 mg/ml
Storage Instructions：Store at -20°C and it should be protected from prolonged exposure to light. This product is stable for 1 year upon receipt, when handled and stored as instructed.
Purification ：Protein A affinity column
Isotype：Rabbit IgG1
Clonality：Monoclonal antibody cocktail
关于柔性 Linker (G4S)n 背景
01/单链抗体（scFv）
完整的抗体由两条重链（heavy chain，H）和两条轻链（light chain，L）构成，透过人工改造，可使其只表达可变区，通过人工合成的连接肽（Linker）基因将抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）连接成重组基因，由该重组基因表达的抗体就称为单链抗体（scFv）。在结构上，可以将重链的N端与轻链的C端相连，也可以将轻链的N端与重链的C端相连。Linker长度通常为15~25个氨基酸，通常由甘氨酸（Gly）和丝氨酸（Ser）构成，即linker（G4S)n，其具有一定弹性及蛋白酶抗性，Linker的作用是连接VH，VL，并保持一定的弹性，使VH，VL的功能区折叠后仍可配对，构成单价抗原结合位点。scFv具有分子量小、穿透性强、特异性高等优点。它们在靶向治疗、影像学诊断和生物检测中发挥着至关重要的作用。重要的是，在细胞治疗领域，scFvs可以作为CAR-T细胞的抗原识别结构域，并决定这些细胞的靶向能力。
研究人员通过对天然多域蛋白质连接体的分析，发现了许多可以用于蛋白融合的候选linker。此外，还设计了许多具有不同序列和构象的经验连接体，用于构建重组融合蛋白。现在常用的经典linker可以分为三类：柔性连接体、刚性连接体和可裂解连接体。
以礼来明星药物，FC融合蛋白度拉糖肽为例，其由两个胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)分子组成，通过柔性linker (G4S)n连接子连接到人类IgG4的Fc区域，避免了因为和Fc融合而带来的药物失活。
其中最常用的柔性连接体主要由Gly和Ser组成，即 (G4S)n linker。通过调整n的大小，可以优化linker的长度，以实现蛋白功能域的适当分离或保持必要的域间相互作用。
以BiTE结构双特异性抗体为例：Amgen BiTE双抗技术平台，是由Micromet公司（后被Amgen收购）开发的一种双特异性抗体的format，即将两个单链抗体通过(G4S)n linker连接在一起，两个单链抗体可分别识别两种不同的抗原。靶向CD19和CD3的双特异性BiTE抗体，其结构形式如下：
综上所述，G4S HRP这款产品适用于以上携有linker （G4S)n结构的单链抗体scFV、融合蛋白、双特异性抗体药物的PK、WB等实验，为其提供筛选、检测和靶向研究中的重要工具抗体。
G4S HRP产品优势：
No.1
高适用性
No.2
高亲和力
No.3
高灵敏度
No.4
高批次稳定性
No.5
无非特异性信号
Ab1 Format
Ab2 Format
| Sample | EC50 (μg/mL) | Top |
| Ab1-Hycells | 0.5461 | 2.783 |
| Ab2-Hycells | 0.06573 | 3.147 |
G4S HRP---PK应用检测
Anti human Fc mAb体系
| Sample | EC50 (μg/mL) | Top |
| Ab1-Casein | 0.5461 | 2.783 |
| Ab1-Monkey Plasma | 0.5328 | 2.923 |
| Sample | EC50 (μg/mL) | Top |
| Ab2-Casein | 0.06169 | 2.725 |
| Ab2-Monkey Plasma | 0.1182 | 2.794 |
结论：用包被Anti human Fc抗体捕获血清中待测抗体的通用体系，适用于猴血清中待测抗体的PK检测。
Antigen体系
| Sample | EC50 (μg/mL) | Top |
| Ab2-Casein | 0.06415 | 2.545 |
| Ab2-Human Plasma | 0.05497 | 2.624 |
| Ab2-Monkey Plasma | 0.06468 | 2.655 |
结论：用包被抗原捕获血清中待测抗体的体系，适用于人血清或猴血清中待测抗体的PK检测。
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