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HiXpan® NK 无血清培养试剂盒(滋养细胞法)
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NK细胞行业背景
免疫治疗作为当下最有前景的癌症治疗方法,其中,自然杀伤 (NK) 细胞更是颇具潜力的细胞。免疫细胞主要包括特异性细胞和非特异性细胞。特异性免疫细胞创新药主要包括CTL、TIL、CAR-T和TCR-T细胞等,CAR-T目前最热门,CAR-T细胞输注后,会产生细胞因子释放综合征和神经毒性两类严重毒副作用可能。CAR-T治疗完全缓解率高,但存在细胞耗竭导致疾病有可能复发的情况,因脱靶现象,目前对于实体瘤的治疗也比较乏力。
非特异性免疫细胞主要以NK细胞为代表。NKG2D和CD244增加了细胞的毒性能力和细胞因子的产生,使其有更好的杀瘤效果。NK细胞无需预先刺激就可起作用,反应速度更快。NK细胞通常不介导发生GVHD,安全性更高。细胞来源丰富,外周血、脐血、人类胚胎干细胞、诱导多功能干细胞甚至NK-92细胞系,可做为现货型免疫细胞的首选之一。CAR-NK细胞同样存在了局限性,比如NK细胞的免疫记忆问题亟待解决;治疗中保持CAR-NK细胞足够的效力,需多次回输,必须有足够数量的高纯度高活性的效应细胞。

NK细胞扩增培养机制
NK细胞体外制备有四大要求,细胞扩增数量、NK细胞纯度、表达受体以及NK细胞的杀伤性。如何得到足够的优质效应NK细胞是最核心的难点之一。原代NK细胞的体外培养大体分为细胞因子法和滋养细胞法。细胞因子法最大的优势就是其成分相对清晰,政策监管相对容易,但是难以实现NK细胞的快速扩增。
研究表明,滋养细胞法能实现NK细胞的快速扩增,得到高纯度高质量的NK细胞,具有良好的稳定性,纯度高,扩增快,滋养细胞本身就经过辐照后才能进行使用,细胞安全与否主要看其具有成瘤性和致瘤性,至于残留的安全性问题,如果滋养细胞本身能被证明是安全的,那某种意义上,残留的碎片也是安全的;致瘤性是指将待检细胞的“细胞成分”接种动物后,诱导动物本身细胞形成肿瘤的特性,接种之前是需要先对待检细胞进行裂解的,证明的是细胞成分是否存在诱导动物本身细胞形成肿瘤的特性。规范的流程操作和一些技术生产过程、存储条件等方面严格的质量控制、支原体、内毒素等也是重要因素。
目前滋养细胞扩增NK的方式,常用的饲养细胞系有RPMI8866、Epstein-Barr 淋巴母细胞系 (EBV-LCL) 和 K562。饲养细胞是一层无法增殖的细胞,它提供细胞外分泌物以帮助另一个细胞增殖。已知用 NK 敏感的经照射后的K562细胞刺激,可增强 NK 细胞体外杀伤活性和增殖活性。另外,通过对K562细胞进行基因修饰使其稳定表达多种细胞因子,在多种细胞因子协同作用下,有助于外周血单个核细胞中的自然杀伤细胞得到定向激活和扩增,可明显增加NK细胞的纯度。
IL-15 NK细胞扩增试剂(滋养细胞)是合佑生生物科技有限公司研发团队研制,用于人类自然杀伤细胞(NK) 扩增培养的试剂,可高效扩增人外周血和脐带血来源的NK细胞(NK细胞经培养可扩增300-400倍,以终末收获NK细胞比起始PBMC计算) , NK细胞纯度高( CD3- CD56+表达率可高于90%)。
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自主化、国产化的原研体系;
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适用于多种来源NK细胞的培养;
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培养13天,NK细胞扩增达300-400倍;
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扩增的NK细胞纯度可高达90%;
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适配主流的免疫细胞基础培养基(不含白细胞介素-2),使用前要在培养基中加入适当浓度的IL-2。
IL-15 NK细胞扩增试剂(滋养细胞)
&供者预筛
经其扩增后的NK细胞具有如下特点:
1)扩增倍数高;
2)效应细胞纯度高,可达到90%以上;
3)操作简便,无需二次添加激活扩增试剂;
4)配合合佑生预筛冻存PBMC,可以提供更加稳定和可重复的扩增效果。
产品编码 产品名称 产品规格 NK881-F NK细胞扩增试剂(滋养层细胞法,IL-15) 1 mL NK881-21-F NK细胞扩增试剂(滋养层细胞法,IL-21) 1 mL NK881-2L IL-15 NK扩增试剂盒2L(滋养层细胞法) 1Kit NK881-21-2L IL-21 NK扩增试剂盒2L(滋养层细胞法) 1Kit 无需二次
添加激活扩增试剂
更便捷高效!
不同Donor NK扩增对比(Fresh)

冻存PBMC复苏后扩增数据

扩增后NK冻存复苏过夜培养前后对比数据

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联系人:谢先生 15201775322 。
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NK扩增试剂(滋养层细胞法)相关文件下载:
IL-21(2L)NK细胞扩增试剂培养套装(滋养细胞)说明书
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