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scFV、BsAb等(含G4S linker)通用PK检测抗体
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- 产品描述
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去年Hycells首发的爆款通用型 CAR 阳性率检测抗体Anti-G4S linker,因其便捷的操作性和精准性,迅速虏获了一批客户的认可与合作。Anti-G4S linker是经广大客户验证的通用型CAR阳性率检测试剂,通过消除不必要且耗时的步骤,加快药物研发进程。它适用于所有靶点的含G4S Linker的CAR检测 ((G4S)n, n≥2),不同抗体类型CAR检测 (含(G4S)n, n≥2);有着强大的免干扰性,无惧抗原干扰,体内检测CAR比例更准确;高灵敏度,极高或者极低浓度下都表现出极佳的检测效率。
基于Anti-G4S linker产品的成功开发和客户应用的正向反馈,Hycells在原有技术服务平台的基础上推陈出新,继续衍生不同应用场景,进一步开发了新品G4S-HRP,致力于服务携有linker(G4S)n结构的融合蛋白、单链抗体scFV、双特异性抗体药物研发平台,为其提供筛选、检测和靶向研究中的重要工具抗体。
货号 产品名称 规格 GS-ARHR20 Anti-(G4S)n (B02H1)mAb(HRP) 20μL GS-ARHR100 Anti-(G4S)n (B02H1)mAb(HRP) 100μL GS-ARHR200 Anti-(G4S)n (B02H1)mAb(HRP) 200μL GS-ARHR1000 Anti-(G4S)n (B02H1)mAb(HRP) 1ml Specificity:This product is specific for scFvs in different species (humanized, mouse) and different orders (VH-linker-VL, VL-linker-VH). It can also recognize various forms of scFv-based bispecific antibodies, such as DART, BiTE, TandAbs, IgG(H)-scFv2, scFv-Fab-Fc, etc.
Host Species:Rabbit
Conjugate:Horseradish peroxidase (HRP)
Concentration:0.5 mg/ml
Storage Instructions:Store at 2~8°C and it should be protected from prolonged exposure to light. This product is stable for 1 year upon receipt, when handled and stored as instructed.
Purification :Protein A affinity column
Isotype:Rabbit IgG1
Clonality:Monoclonal antibody cocktail
关于柔性 Linker (G4S)n 背景
01/单链抗体(scFv)
完整的抗体由两条重链(heavy chain,H)和两条轻链(light chain,L)构成,透过人工改造,可使其只表达可变区,通过人工合成的连接肽(Linker)基因将抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)连接成重组基因,由该重组基因表达的抗体就称为单链抗体(scFv)。在结构上,可以将重链的N端与轻链的C端相连,也可以将轻链的N端与重链的C端相连。Linker长度通常为15~25个氨基酸,通常由甘氨酸(Gly)和丝氨酸(Ser)构成,即linker(G4S)n,其具有一定弹性及蛋白酶抗性,Linker的作用是连接VH,VL,并保持一定的弹性,使VH,VL的功能区折叠后仍可配对,构成单价抗原结合位点。scFv具有分子量小、穿透性强、特异性高等优点。它们在靶向治疗、影像学诊断和生物检测中发挥着至关重要的作用。重要的是,在细胞治疗领域,scFvs可以作为CAR-T细胞的抗原识别结构域,并决定这些细胞的靶向能力。

研究人员通过对天然多域蛋白质连接体的分析,发现了许多可以用于蛋白融合的候选linker。此外,还设计了许多具有不同序列和构象的经验连接体,用于构建重组融合蛋白。现在常用的经典linker可以分为三类:柔性连接体、刚性连接体和可裂解连接体。
以礼来明星药物,FC融合蛋白度拉糖肽为例,其由两个胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)分子组成,通过柔性linker (G4S)n连接子连接到人类IgG4的Fc区域,避免了因为和Fc融合而带来的药物失活。

其中最常用的柔性连接体主要由Gly和Ser组成,即 (G4S)n linker。通过调整n的大小,可以优化linker的长度,以实现蛋白功能域的适当分离或保持必要的域间相互作用。
以BiTE结构双特异性抗体为例:Amgen BiTE双抗技术平台,是由Micromet公司(后被Amgen收购)开发的一种双特异性抗体的format,即将两个单链抗体通过(G4S)n linker连接在一起,两个单链抗体可分别识别两种不同的抗原。靶向CD19和CD3的双特异性BiTE抗体,其结构形式如下:

综上所述,G4S HRP这款产品适用于以上携有linker (G4S)n结构的单链抗体scFV、融合蛋白、双特异性抗体药物的PK、WB等实验,为其提供筛选、检测和靶向研究中的重要工具抗体。
G4S HRP产品优势:
No.1
高适用性
No.2
高亲和力
No.3
高灵敏度
No.4
高批次稳定性
No.5
无非特异性信号

Sample EC50 (μg/mL) Top Ab1-Hycells 0.5461 2.783 Ab2-Hycells 0.06573 3.147 G4S HRP---PK应用检测
Anti human Fc mAb体系


Sample EC50 (μg/mL) Top Ab1-Casein 0.5461 2.783 Ab1-Monkey Plasma 0.5328 2.923 Sample EC50 (μg/mL) Top Ab2-Casein 0.06169 2.725 Ab2-Monkey Plasma 0.1182 2.794 结论:用包被Anti human Fc抗体捕获血清中待测抗体的通用体系,适用于猴血清中待测抗体的PK检测。
Antigen体系

Sample EC50 (μg/mL) Top Ab2-Casein 0.06415 2.545 Ab2-Human Plasma 0.05497 2.624 Ab2-Monkey Plasma 0.06468 2.655 结论:用包被抗原捕获血清中待测抗体的体系,适用于人血清或猴血清中待测抗体的PK检测。
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